问题详情:
利用生物工程技术,可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子IV,用于血友病的治疗.请回答下列问题:
(1)根据凝血因子IV基因上游和下游的碱基序列,可用 技术获取并扩增基因.构建该基因表达载体时,所用到的工具酶是 ,该基因表达载体中,凝血因子Ⅳ基因的上游和下游分别是 .
(2)将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是 .受体细胞选用受精卵的优点是细胞大易*作、营养物质含量高和 .
(3)在体外胚胎培养时,应选用囊胚的 进行DNA分析,用于选择雌*胚胎.此期的胚胎也适于胚胎分割移植,此技术的优点是 .
(4)人凝血因子IV是一种胞外酶,该蛋白的加工是在 等细胞器上进行的.人凝血因子IV只在乳腺细胞合成的原因是 .
【回答】
解:(1)可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计引物,用PCR技术进行体外大量扩增获得目的基因.构建该基因表达载体时,需要限制酶内切酶切割目的基因和运载体,再用DNA连接酶链接,形成表达载体.启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质.终止子也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端.
(2)受体细胞是动物细胞,常用显微注*法将目的基因导入受体细胞中.由于受精卵细胞大易*作、营养物质含量高、细胞全能*高,因此常被作为受体细胞选用.
(3)在做胚胎*别鉴定时,需要取囊胚的滋养层细胞做DNA分析,进行*别鉴定.此期的胚胎也适于胚胎分割移植,胚胎分割技术具有充分发挥雌*动物的生殖潜力(快速大量繁殖)的优点.
(4)分泌蛋白在内质网上的核糖体上合成,进入内质网进行加工、分类、包装,形成囊泡进入高尔基体,由高尔基体进行进一步加工,形成囊泡,运向细胞膜,由细胞膜分泌到细胞外.由于基因的选择*表达,所以人凝血因子IV只在乳腺细胞合成.
故*为:
(1)PCR 限制*内切酶和DNA连接酶 启动子和终止子
(2)显微注*法 细胞全能*高
(3)滋养层细胞 充分发挥雌*动物的生殖潜力(快速大量繁殖)
(4)内质网、高尔基体 基因的选择*表达
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题